RESUMO Objetivos: Investigar a reprodutibilidade intra-laboratorial dos fenótipos clínicos e avaliar anisotropias ópticas em córneas de coelhos com deficiência de células tronco limbais. Métodos: Lesões ao limbo foram feitas no olho direito de 23 coelhos adultos da Nova Zelândia Branco, usando um protocolo altamente agressivo, que envolveu peritomia limbal em 360 graus, ceratolimbectomia, cauterização por álcali, e remoção mecânica de epitélio remanescente. Os olhos foram clinicamente avaliados por 28 dias, inclusive por citologia de impressão corneal. As córneas que manifestaram um conjunto de alterações típicas de deficiência de células tronco limbais foram coletadas e submetidas à estudos em histopatologia e em anisotropias ópticas. Córneas saudáveis foram usadas como controles. Diferenças de caminho óptico de birrefringência relacionada à organização do colágeno estromal, e dicroísmo linear relacionado à expressão e à orientação das cadeias de glicosaminoglicanos dos proteoglicanos estromais, foram quantificados por microscopia de luz polarizada. Resultados: Um olho apresentou hipópio e foi excluído do estudo. Todos os olhos estudados (n=22) apresentaram sinais de inflamação ocular. A citologia de impressão não detectou células caliciformes na superfície corneal. Doze de 22 córneas manifestaram alterações clínicas típicas de deficiência de células tronco limbais, caracterizado por defeitos epiteliais, infiltrados inflamatórios, opacidade de moderada à severa, e neovascularização. Estudos por microscopia de luz polarizada mostraram que a deficiência de células tronco limbais aumentou a diferenças de caminho óptico corneal em 24,4% (versus controles). As córneas com deficiência de células tronco limbais foram menos dicroicas do que as córneas controle. Conclusões: Coelhos com deficiência de células tronco limbais, para aplicações em estudos pré-clínicos, devem ser rigorosamente selecionados para assegurar homogeneidade experimental, pois há evidências de que protocolos utilizados para indução de deficiência de células tronco limbais não estão associados com boa reprodutibilidade intra-laboratorial de fenótipos clínicos. A deficiência de células tronco limbais, como induzida aqui, alterou as propriedades ópticas anisotrópicas do estroma corneal. Tais alterações são indicativas de mudanças no empacotamento de colágeno e na orientação das cadeias de glicosaminoglicanos dos proteoglicanos. Conhecimentos nessas alterações são importantes para potencializar estratégias que visam a restabelecer a integridade morfofuncional do estromal corneal acometido pela deficiência de células tronco limbais.

ABSTRACT Purposes: To investigate the intra-laboratory reproducibility of clinical features and to evaluate corneal optical anisotropies in a rabbit model of limbal stem cell deficiency. Methods: Limbal injury was induced in the right eye of 23 adult New Zealand White rabbits using a highly aggressive protocol that combined 360 degrees limbal peritomy, keratolimbectomy, alkaline chemical burn, and mechanical removal of the epithelium. Clinical evaluation of the injured eyes was performed for 28 days and included corneal impression cytology. Corneas with a severe clinical outcome set typical of limbal stem cell deficiency were then collected, subjected to a histopathological examination, and examined for optical anisotropies. Corneas from healthy rabbit eyes were used as controls. Differences in optical path due to stromal collagen birefringence, as well as linear dichroism related to the expression and spatial orientation of glycosaminoglycan chains from proteoglycans, were measured from cross-sections under a quantitative polarized light microscope. Results: One eye showed signs of hypopyon and was excluded. Signs of ocular inflammation were observed in all eyes studied (n=22). Corneal impression cytology did not detect goblet cells. Twelve of the 22 corneas presented a clinical outcome set typical of limbal stem cell deficiency, which is characterized by the presence of epithelial defects, inflammatory cells, moderate-to-severe opacity, and neovascularization. Microscopic studies under polarized light revealed that relative to controls, limbal stem cell deficiency caused a 24.4% increase in corneal optical path differences. Further, corneas with limbal stem cell deficiency were less dichroic than controls. Conclusions: These results suggest that rabbit models of limbal stem cell deficiency must be rigorously screened for use in preclinical studies to ensure experimental homogeneity because protocols used to create limbal stem cell deficiency could be not associated with good intra-laboratory reproducibility of clinical features. Limbal stem cell deficiency, as induced herein, altered the optical anisotropic properties of the corneal stroma. Such alterations are indicative of changes in collagen packing and the spatial orientation of glycosaminoglycan chains from proteoglycans. Knowledge of these changes is important to potentiate strategies aimed at restoring the morphofunctional integrity of the corneal stroma affected by limbal stem cell deficiency.

Abstract Purpose: To establish and compare protocols of alkaline cauterization for inducing corneal angiogenesis in murine models. Methods: Twenty-four adult Wistar rats were distributed into four groups (G1, G2, G3, and G4). The right eye cornea from each rat was cauterized using filter paper (3 mm), soaked in a solution of silver and potassium nitrates (3:1). Cauterization times were 10 (G1 and G4), or 20 seconds (G2 and G3). Cauterized corneas were washed with Ringer’s lactate solution. The filter paper was either removed before washing (G1 and G2), or kept on the corneas (G3 and G4). Corneas were photographed at multiple time points (2, 4, 6, 8, 11, 13, and 15 days after the procedure), and neovascularization parameters were assayed. Results: Neovascularization was observed in 66% of G1 corneas, and 100% of G2, G3, and G4 corneas. On day 15, G1 corneas showed smaller vascularized areas (12.63 ± 12.59%) compared to those in the G3 (41.95 ± 17.32%) and G4 (33 ± 11.74%) (P < 0.05) groups. Conclusions: The silver and potassium nitrate solution effectively induced corneal angiogenesis. The G2, G3, and G4 protocols showed excellent reproducibility, and induced vascularization in 100% of corneas.

RESUMO Muitas abordagens têm sido utilizadas para ampliar entendimentos sobre a regulação microambiental das células tronco epiteliais limbais. Neste contexto, pesquisadores têm exaustivamente investigado a participação de fatores de crescimento, fatores de sobrevida, citocinas, enzimas e moléculas permeáveis secretadas pelas células limbais. Entretanto, evidências recentes sugerem que o destino (ie. autorrenovação ou recrutamento para a via de diferenciação) das células tronco também sofre influência de estímulos biofísicos ou mecânicos relacionados à organização supramolecular e à natureza liquido-cristalina (mesofases) da matriz extracelular estromal. Esses estímulos podem ser percebidos e traduzidos pelas células tronco em sinais bioquímicos que geram respostas funcionais, através de um processo designado de mecanotransdução. Objetiva-se, com a presente revisão, oferecer ao leitor perspectivas supramoleculares sobre a regulação microambiental das células tronco epiteliais limbais e a diferenciação de sua progênie.

ABSTRACT Various approaches have been taken to improve our knowledge of the microenvironmental regulation of limbal epithelial stem cells. Researchers have extensively investigated the roles of growth factors, survival factors, cytokines, enzymes, and permeable molecules secreted by the limbal cells. However, recent evidence suggests that stem cell fate (i.e., self-renewal or differentiation) can also be influenced by biophysical and mechanical cues related to the supramolecular organization and the liquid crystalline (mesophase) nature of the stromal extracellular matrix. These cues can be sensed by stem cells and transduced into intracellular biochemical and functional responses, a process known as mechanotransduction. The objective of this review is to offer perspectives on the supramolecular microenvironmental regulation of limbal epithelial stem cells and the differentiation of their progeny.

RESUMO: Objetivou-se avaliar a presença de membrana pupilar persistente (MPP) em ratos. Foram oftalmicamente avaliados, 30 ratos com idade entre três e quatro meses, e peso entre 300 e 500 gramas, fornecidos pelo Biotério Central da Universidade Estadual Paulista (UNESP), campus de Botucatu, SP, Brasil. Todos os animais passaram por inspeção à biomicroscopia, teste da fluoresceína e também pela tonometria de rebote. Encontrou-se MPP em 15 dos animais (50%), cuja origem pode estar associada à herdabilidade.

ABSTRACT: The aim of this research was to evaluate the presence of persistent pupillary membrane (PPM) in rats. Thirty rats between three and four months of age and weighing 300-500 grams, provided by the biothery section of the General Administration at Universidade Estadual Paulista (UNESP), Botucatu, SP, Brazil, were subjected to ophthalmological examination by slit lamp biomicroscopy, fluorescein eye stain test and rebound tonometry. We found PPM with possible hereditary origin in 15 animals (50%).

RESUMO: O estudo examinou a eficácia de um dispositivo intravítreo de liberação de dexametasona para o controle da inflamação ocular em cães, após facoemulsificação. Um dispositivo de copolímero poli (ácido lático-co-glicólico) foi implantado via pars plana na câmera vítrea, imediatamente antes da facoemulsificação (grupo dispositivo [GD], n=20). Após a cirurgia, o grupo controle (GC) recebeu terapia esteroide, midriático e antibiótico. O mesmo protocolo de tratamento foi adotado no GD, exceto pelos esteroides. Todos os olhos foram examinados antes do procedimento e em diferentes tempos após a facoemulsificação. A ultrassonografia mostrou que o dispositivo diminuiu em tamanho, sendo observado, apenas, remanescentes aos 60 dias de pós-operatório (DPO). Sinais de uveíte foram observados em 35% do GD no DPO 7, entretanto, no DPO 14, 50% dos olhos tiveram sinais de uveíte e requereram terapia esteroide local. A pressão intraocular (PIO) foi maior no GD, comparativamente ao GC, imediatamente após a cirurgia. A PIO não diferiu no DPO 7 e no DPO 14, entretanto foi menor nos momentos pós-operatórios mais tardios (DPO 30 a 90). Valores de flare foram maiores no GD que no GC, imediatamente após a cirurgia, mas não mostraram diferenças nos momentos subsequentes. Em suma, o dispositivo intravítreo de dexametasona não controlou adequadamente a inflamação intraocular em cães submetidos à facoemulsificação.

ABSTRACT: This study examined the efficacy of an intravitreal dexamethasone-loaded device for the control of postoperative ocular inflammation in dogs following phacoemulsification. Twenty dogs with bilateral mature senile cataracts were prepared for surgery using routine protocols. A biodegradable poly (lactic-co-glycolic acid) copolymer device was inserted through the pars plana into the vitreous chamber immediately before phacoemulsification (device group [DG], n=20). Following surgery, a conventional group (CG) received local and systemic steroids, mydriatics, and antibiotic therapy. The same treatment protocol was adopted in DG, except for steroids. All eyes were examined before surgery and at various times after phacoemulsification. Ultrasonography showed gradual device shrinkage, with only remnants remaining at postoperative day (POD) 60. Signs of uveitis were observed in 35% of the DG on POD 7, but by POD 14, 50% of eyes showed signs of uveitis and these eyes required local steroid therapy. The intraocular pressure (IOP) was higher in the DG than in the CG immediately after surgery. IOP did not differ on POD 7 and POD 14, but was lower during the late postoperative period (POD 30 to 90). Flare values were greater in the DG than in the CG immediately following surgery, but showed no subsequent differences. In summary, the intravitreal dexamethasone device did not adequately control intraocular inflammation in dogs undergoing phacoemulsification.

RESUMO: Objetivou-se, com a pesquisa, avaliar os efeitos clínicos e microscópicos da associação do omento de coelho com a membrana amniótica (AM) canina, na ceratoplastia lamelar em coelhos. Dois grupos foram constituídos: um recebeu enxerto de omento alógeno livre, recoberto por AM (grupo OM- graft); o outro recebeu enxerto de AM contendo células mesenquimais derivadas do omento (grupo OM-cell). Manifestações clínicas foram avaliadas em diferentes tempos de pós-operatórios. Após as avaliações clínicas, coelhos foram submetidos à eutanásia e córneas foram colhidas para histopatologia e imunohistoquímica (Ki-67, marcador de proliferação). Relativamente às manifestações clínicas, ambos os grupos apresentaram sinais de quemose, blefarospasmo, secreção ocular, hiperemia e opacidade/edema. Neovascularização foi observada no grupo OM-cell. Avaliações à histopatologia mostraram que uma amostra de OM-cell apresentou ilhas de epitélio dentro do estroma. Aos 30 dias de pós-operatório, observou-se reepitelização corneal completa, em OM-graft e OM-cell. O grupo OM-cell apresentou mais células positivas para Ki-67. O omento livre e suas células, associados à AM, contribuíram para a reparação corneal, que se completou após 30 dias de ceratoplastia lamelar.

ABSTRACT: The objective of this research was to evaluate the clinical and microscopic effects in rabbits of lamellar keratoplasty using allogeneic omentum associated with canine amniotic membrane (AM). Rabbits were divided into two groups: one received the allogeneic free omental graft covered with the AM (OM-graft group), while the other received the AM graft containing omental mesenchymal cells (OM-cell group). Clinical signs were evaluated on different postoperative days. After the clinical assessments, the rabbits were euthanized and their corneas were obtained for histopathology and immunohistochemistry (Ki-67, marker for proliferation). Both groups showed chemosis, blepharospasm, eye discharge, hyperemia, and corneal opacity/edema. Neovascularization was observed in the OM-cell group. Histopathological evaluation revealed epithelial islands within the stroma of OM-cell samples. Thirty days after surgery, complete corneal re-epithelialization had occurred in both groups. The OM-cell group showed more Ki-67 positive cells. The free omentum and its cells, combined with the AM, contributed to corneal repair, a process that was completed 30 days after lamellar keratoplasty.

RESUMO Objetivo: Estudaram-se os efeitos da instilação de morfina 1% sobre parâmetros clínicos, turbidez do humor aquoso e expressão de fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa), de interleucina-1 beta (IL-1beta), de prostaglandina E2 (PGE2) e de mieloperoxidase (MPO), em olhos de coelhos com uveíte induzida por endotoxina. Material e Métodos: Vinte e quatro coelhos da raça Nova Zelândia Branco foram distribuídos em quatro grupos (n=6, em cada): grupo controle (GC), morfina (GM), naloxona (GN) e morfina-naloxona (GMN). Sob anestesia dissociativa, injetou-se 0,1 mL de solução contendo 0,2 µg de lipossacarídeo (LPS) endotóxico da parede celular de Salmonella typhimurium na câmara vítrea. Realizou-se avaliação clínica (hiperemia conjuntival, quemose, blefaroespasmo e secreção ocular) e a flaremetria a “laser” antes (basal) e após 10 e 20 horas da indução da uveíte. No final, os coelhos foram submetidos à eutanásia e os olhos com uveíte foram enucleados para a quantificação dos níveis de TNF-alfa, IL-1 beta, PGE2 e MPO. Diferenças foram consideradas significativas quando p<0,05. Resultados: Os grupos da pesquisa não diferiram quanto aos parâmetros clínicos e os valores de “flare”. Observou-se elevação significativa nos níveis de TNF-alfa e de IL-1 beta, comparativamente ao basal, nos grupos GC, GM, GN e GMN (p<0,05). Valores de PGE2 variaram entre os grupos GM e GNM (p<0,05). A atividade de MPO aumentou após a indução da uveíte, porém, sem significância estatística (p>0,05). Conclusões: A morfina não atuou sobre parâmetros clínicos, “flare” e expressão dos mediadores inflamatórios estudados, quando instilada em olhos de coelhos com uveíte induzida por injeção intravítrea de LPS.

ABSTRACT Purpose: To evaluate the effects of 1% morphine instillation on clinical parameters, aqueous humor turbidity, and expression levels of tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin-1 beta (IL-1beta), prostaglandin E2 (PGE2), and myeloperoxidase (MPO) in rabbits with endotoxin-induced experimental uveitis. Methods: Twenty four New Zealand white rabbits were divided into four groups (n=6 each): control (CG), morphine (MG), naloxone (NG), and morphine-naloxone (MNG) groups. Under dissociative anesthesia, 0.1 mL of solution containing 0.2 µg of lipopolysaccharide (LPS) endotoxin from the Salmonella typhimurium cell wall was injected in the vitreous chamber. Clinical evaluations (conjunctical hyperemia, chemosis blepharospasm, and ocular discharge) and laser flaremetry were performed before (baseline), and 10 and 20 hours after induction of uveitis. Rabbits were subsequently euthanized and eyes were enucleated to quantify expression levels of TNF-α, IL-1 beta, PGE2, and MPO. Results: No significant differences in clinical parameters and flare values were observed between the study groups. TNF-α and IL-1 beta levels increased significantly in the CG, MG, NG, and MNG groups compared to baseline (P<0.05). Significant differences in PGE2 levels were observed between the MG and NMG groups (P<0.05). A trend toward increased MPO activity was observed in response to uveitis induction; however, this trend did not reach statistical significance (P>0.05). Conclusions: Morphine has no effect on clinical parameters, flare, or expression levels of inflammatory mediators in a rabbit model of uveitis induced by intravitreal injection of LPS.

Afecções da superfície ocular são frequentes em cães braquicefálicos. Dentre as raças comumente acometidas, tem-se a Shih Tzu, cujos parâmetros oftálmicos não são conhecidos em sua plenitude e o foram, em parte, avaliados nesta pesquisa. Sob contenção física, empregou-se o teste lacrimal de Schirmer, o de ruptura do filme lacrimal, a estesiometria, a biomicroscopia, a microscopia especular de não contato, a flaremetria a laser, a tonometria de aplanação, a ecografia e a oftalmoscopia. Foram estudados 48 olhos de 24 indivíduos machos ou fêmeas, com idades variando entre dois a quatro anos e peso entre cinco a 10kg. Aos dados, aplicou-se a estatística descritiva. Relativamente às médias e aos erros padrão, encontraram-se, quanto ao teste lacrimal de Schirmer, 26,145±0,803mm min-1 e, quanto à ruptura do filme lacrimal, 13,668±0,538s. À estesiometria, encontraram-se 2,395±0,071cm. À biomicroscopia, observaram-se 70,83% dos olhos com entrópio de canto medial, 42% apresentaram pelos em carúncula medial, 33% distiquíase, 27% opacidade paracentral e 13% melanose corneal. Médias e erros padrão, no que concerne à densidade de células endoteliais, foram de 2221,591±20,161céls mm-2. Quanto à hexagonalidade, foram de 63,770±1,805%; quanto à área, foram de 451,895±4,179mm2; em relação à espessura corneal, foram de 0,490±0,007mm. À flaremetria a "laser", encontraram-se 1,720±0,216PC ms-1. À tonometria, 16,118±0,460mmHg. As médias e os erros padrão, à ultrassonografia, foram de 20,255±0,134mm para diâmetro axial horizontal; de 6,624±0,031mm, para espessura da lente; de 4,064±0,109mm, para profundidade da câmara anterior; e de 9,565±0,054mm, para a câmara vítrea. O padrão de imagens à oftalmoscopia não divergiu do já reportado em cães de outras raças. De consoante com os resultados obtidos, há como admitir que parâmetros de referência para cães adultos da raça Shih Tzu, estudados na presente pesquisa, não divergiram sobremaneira dos conhecidos para outras raças de cães, à exceção do tempo de ruptura do filme lacrimal, cujos valores ficaram aquém da média para a espécie, e os da estesiometria de Cochet-Bonnet, que foram superiores.

Ocular surface diseases are often diagnosed in brachycephalic dogs. The ophthalmic parameters of the Shih Tzu dogs are evaluated in this study since this breed is among the most commonly affected by these diseases. In this study, ophthalmic parameters of this breed were partly studied under physical restraint. Schirmer tear test, breakup time test, aesthesiometry, biomicroscopy, non-contact specular microscopy, laser flaremetry, applanation tonometry, ultrasonography and ophthalmoscopy were carried in 48 eyes of 24 male and female dogs, aged from two to four years, weighing between 5 and 10kg. All dogs were from a breeding kennel. Descriptive statistics were applied to the data. Mean and standard error for Schirmer tear test was 26.145±0.803mm min-1; breakup time test, 13.668±0.538s; and aesthesiometry, 2.395±0.071cm. The biomicroscopy evaluation showed that 70.83% of the eyes had medial entropion; 42% caruncular trichiasis; 33% distichiasis, 27% mild paracentral corneal opacity; and 13% corneal melanosis. Mean and standard error for endothelial cell density was 2221.591±20.161cells mm-2; endothelial cell hexagonality, 63.770±1.805%; endothelial cell area, 451.895±4.179mm2; central corneal thickness, 0.490±0.007 mm; laser flaremetry, 1.720±0.216PC ms-1; applanation tonometry, 16.118±0.460mmHg; axial length, 20.255±0.134mm; lens thickness, 6.624±0.031mm; anterior chamber, 4.064±0.109mm; and vitreous chamber, 9.565±0.054mm. Ophthalmoscopy findings were not different from previous reports for other breeds. The results showed that the ophthalmic Shih Tzu parameters did not differ from other breeds according to data in the literature, except for the breakup time and Cochet-Bonnet aesthesiometry.

RESUMO Objetivos: Avaliar os efeitos da nalbufina 1% sobre a expressão da metaloproteinase 1 (MMP-1), da metaloproteinase 9 (MMP-9) e do fator de crescimento opióide (OGF), em córneas de coelhos submetidas à ceratectomia lamelar. Métodos: Constituíram-se dois grupos: grupo nalbufina (GN, n=30), que recebeu 30 µL de nalbufina 1% em 4 aplicações diárias, a intervalos regulares, até a epitelização corneal; controle (GC, n=30), que recebeu solução salina nas mesmas condições adotadas no GN. As córneas foram colhidas para imuno-histoquímica decorridos 1, 3, 5, 7 e 9 dias das ceratectomias lamelares, visando a se avaliarem as MMP-1, MMP-9 e OGF. Resultados: A expressão das MMP-1 e de MMP-9 se elevou até o quinto dia de avaliação, sem diferença entre GN e GC (p>0,05). Nos dias 7 e 9, observou-se redução significativa na expressão das enzimas (p<0,01), sendo que diferenças não foram observadas entre os grupos (p>0,05). O OGF exibiu imunomarcação constante em todos os períodos (p>0,05), restrita ao epitélio corneal. Não foram encontradas diferenças entre os grupos (p>0,05). Conclusões: Com base dos resultados obtidos, há como admitir que a nalbufina 1% não alterou o padrão de expressão da MMP-1, da MMP-9 e do OGF em córneas de coelhos submetidas à ceratectomia lamelar.

ABSTRACT Purposes: To evaluate the effects of nalbuphine 1% on the expression of metalloproteinase 1 (MMP-1), metalloproteinase 9 (MMP-9), and opioid growth factor (OGF) in rabbit corneas after lamellar keratectomy. Methods: The rabbits were assigned to two groups: group nalbuphine (GN, n=30), which received 30 µL of nalbuphine 1% in 4 daily applications at regular intervals until corneal epithelialization, and group control (GC, n=30), which received physiological saline solution under the same conditions adopted in GN. The corneas were collected for immunohistochemistry on days 1, 3, 5, 7, and 9 after lamellar keratectomy, and the expressions of MMP-1, MMP-9, and OGF were analyzed. Results: The expressions of MMP-1 and MMP-9 increased until day 5 of the evaluation, with no differences observed between GN and GC (p>0.05). On days 7 and 9, significant reductions were observed in the expression of MMP-1 (p<0.01), with no differences observed between GN and GC (p>0.05). The expression of OGF was constant in all periods (p>0.05), restricted to the corneal epithelium, and there was no difference between the groups (p>0.05). Conclusions: The study results showed that nalbuphine 1% did not alter the expression patterns of MMP-1, MMP-9, and OGF in rabbit corneas after lamellar keratectomy.

Objetivos: Avaliarem-se os efeitos do cetorolaco de trometamina 0,5%, sem conservante, sobre a expressão da iNOS e da MMP-9, em córneas com úlceras químicas. Métodos: Doze olhos de coelhos machos, 120 dias de idade, foram tratados (GT ), a cada 6 horas, com o cetorolaco de trometamina 0,5% e outros 12 com solução salina (GC), imediatamente à ocorrência de úlceras por hidróxido de sódio (NaOH) 1 mol/L. A reepitelização foi monitorada por fluresceína a cada seis horas. Decorridas 24 horas, seis córneas (n=6) de cada grupo foram colhidas (primeiro momento). As demais (n=6) o foram após a sua reepitelização (segundo momento). Em ambos os momentos, avaliaram-se o infiltrado inflamatório e as condições do epitélio neoformado (HE). Por imuno-histoquímica, avaliou-se a imunomarcação de iNOS e de MMP-9. Resultados: A média do tempo de epitelização no GT foi de 55 ± 0,84 horas. No GC, ela foi de 44 ± 1,06 horas (p=0,001). Às 24 horas, as córneas do GT apresentaram menor exsudação inflamatória (p<0,01). No segundo momento, o GT mostrou discreta exsudação inflamatória (p>0,05) e menor número de camadas epiteliais comparativamente ao GC. A média de imunomarcação de iNOS em células do estroma não diferiu do GT, em ambos os momentos (p>0,05). No segundo momento, a região central da córnea expressou mais iNOS, comparativamente à periférica, em ambos os grupos. Não se observaram diferenças significativas nos escores de imunomarcação epitelial de iNOS entre os grupos e os momentos (p=0,69). Os escores de imunomarcação epitelial para MMP-9 não diferiram entre os grupos (p=0,69). A média de imunomarcação da MMP-9 em células do estroma não exibiram diferenças entre os grupos e momentos da avaliação (p=0,32). Não houve correlação entre a imunomarcação de iNOS e de MMP-9, assim como quanto ao quantitativo de células inflamatórias e à imunomarcação de iNOS. Conclusões: Cetorolaco 0,5% reduziu a inflamação e atrasou a epitelização na queimadura corneal por álcali sem alterar a expressão de iNOS ou MMP-9 Descritores: Úlcera da córnea/induzida quimicamente; Cetorolaco de trometamina/administração; iNOS; MMP-9

Purposes: To assess the effects of 0.5% ketorolac tromethamine without preservatives on the expression of iNOS and MMP-9 in alkali burn ulcers. Methods: Twelve eyes of 120-day-old male rabbits were treated (TG) every 6 h with 0.5% ketorolac tromethamine and 12 other eyes were treated with saline solution (CG), immediately after the occurrence of ulcers by 1 M sodium hydroxide (NaOH). Re-epithelialization was monitored using fluorescein every 6 h. After 24 h, six corneas (n=6) of each group were collected (M1). The others (n=6) were collected after reepithelialization (M2). At both moments, the inflammatory infiltrate and the conditions of the newly formed epithelium were histologically analyzed. iNOS and MMP-9 were evaluated by immunohistochemistry. Results: Mean epithelialization time in TG was 55 ± 0.84 h. In CG, it was 44 ± 1.06 h (p=0.001). At M1, corneas of TG had lower inflammatory exudation compared with (p <0.001). At M2, TG revealed discrete inflammatory exudation (p>0.05) and lower numbers of epithelial layers compared with CG. The mean iNOS in stromal cells did not differ in TG over both moments compared with CG (p>0.05) At M2, the central corneal region expressed more iNOS in both groups compared with the peripheral region. No significant differences were observed in iNOS scores of epithelial immunostaining between the groups and across M1 and M2 (p=0.69). Epithelial immunostaining scores for MMP-9 did not differ in TG compared with CG (p=0.69). The average immunostaining score of MMP-9 in stromal cells showed no differences between groups or moments. There was no correlation between immunostaining of iNOS and MMP-9 or between the amount of inflammatory cells and immunostaining of iNOS. Conclusions: Use of 0.5% keratolac tromethamine reduced inflammation and delayed reepithelialization in a cornea alkali burn model without impacting the expression of iNOS or MMP-9.

O objetivo do estudo foi determinar se o anel de tensão capsular (ATC), isoladamente ou associado à implantação de uma lente intraocular, poderia diminuir a ocorrência de opacificação da cápsula posterior (OCP) após a cirurgia de catarata por facoemulsificação em cães. Para tanto, cães portadores de catarata imatura ou madura foram avaliados, perfazendo um total de vinte olhos. Em todos os animais, foram excluídas quaisquer doenças oftálmicas e sistêmicas concomitantes. Os olhos foram selecionados aleatoriamente para receber o anel (ATC) isolado ou em associação com a lente. Flaremetria a laser e avaliações clínicas foram realizadas aos 2, 7, 14, 21, e 28 dias de pós-operatório. Fotografias foram tomadas aos 28 e a seguir a cada 30 dias, até os 180 dias. Os resultados mostraram inflamação mais importante nos olhos com IOL, embora, entre os parâmetros avaliados, apenas nas sinéquias houve diferença estatisticamente significativa. No entanto, em ambas as técnicas, quase nenhuma OCP ocorreu até o momento final das avaliações. Tais resultados sugerem que os anéis de tensão capsular (ATC) podem ser úteis na prevenção da opacidade capsular pós-operatória, sem complicações decorrentes

The purpose of the study was to determine whether capsular tension ring (CTR) alone or associated with the implantation of an intraocular lens (IOL) could decrease the occurrence of posterior capsular opacification (PCO) after phacoemulsification cataract surgery in dogs. Twenty eyes of client-owned dogs with immature or mature cataracts were included in this study. In all the animals, any ophthalmic or systemic concurrent disease was excluded. The eyes were randomly selected to receive CTR alone or in association with the IOL. Laser flaremetry and clinical evaluations were conducted on post-operative days 2, 7, 14, 21 and 28. Fundus photographs were taken at the 28th and then every 30 days, up to 180 days. The results showed more inflammatory response on eyes with IOLs, although among the parameters evaluated, solely the synechiae showed significant statistical differences. Nevertheless, in both techniques almost no PCOs occurred at the end of the evaluations. These results suggest that the CTRs can be useful in the prevention of the post-operative capsular opacities, with minor complications

A catarata está entre as afecções oculares mais frequentes em cães, sendo a facoemulsificação o método que melhor se adequa à sua terapia. A opacidade de cápsula posterior (OCP) encontra-se entre as complicações mais comuns e se manifesta em semanas ou meses após a facectomia. Lentes intraoculares, empregadas na correção da hipermetropia pós-cirúrgica, contribuem para a prevenção das OCPs, especialmente as acrílicas dobráveis, com bordas truncadas ou quadradas. Entretanto, a sua implantação pode resultar na perda de células endoteliais. Com a pesquisa, propuseram-se avaliar a morfologia e a celularidade endoteliais, a microscopia especular de não contato, em pacientes afácicos e em pseudofácicos. Foram analisados a densidade celular, a área celular, o coeficiente de variação e o percentual de células hexagonais inter e entre os grupos. Ao longo dos momentos da avaliação, a densidade das células endoteliais não se alterou significativamente dentro dos grupos. Na comparação entre os grupos, ela foi maior nos pseudofácicos, em períodos que variaram de 7 a 30 dias, entretanto retornaram a valores próximos aos iniciais, tornando a diferença entre os dois grupos não significativa ao final da avaliação. Relativamente à área celular e ao coeficiente de variação, não houve diferença significativa, inter e entre os grupos. Houve diferença dentro dos grupos relativamente à hexagonalidade, com diminuição percentual após a facoemulsificação. As condições retornaram ao basal. Na comparação entre pacientes pseudofácicos e afácicos, houve diminuição nos pseudofácicos imediatamente à cirurgia.

Cataract is one of the most common ocular diseases in dogs, and phacoemulsification is considered its treatment of choice. Posterior capsular opacity (PCO) is a frequent complication and may occur weeks or months after the surgery. It is known that intraocular lenses (IOL) used for the correction of post-operative hypermetropia are an adjunctive aid in the prevention of PCOs, mainly the foldable acrylics designs with square and truncated edges. However, IOL placement may result in endothelial cell loss. This study evaluated the morphology and cellularity of the endothelium by non-contact specular microscopy in aphakic and pseudophakic dogs. Endothelial cell density, endothelial cell area, coefficient of variation and hexagonal cells percent were analyzed for each group and between groups. During all evaluation periods, endothelial cell density did not alter in any group. From days 7 to 30, endothelial cell density was higher in pseudophakic dogs. However, values returned to normal and, by the end of the study, no significant difference was observed. Cell area and variation coefficient did not differ in each group or between groups. Hexagonal cells percent significantly reduced after phacoemulsification in both groups. With time, this condition returned to initial values. When both groups were compared, hexagonal cells percent were decreased in the pseudophakic group, immediately after the surgeries.

Os efeitos do sildenafil sobre a circulação retrobulbar e a retiniana foram estudados em 18 coelhos machos adultos, albinos, homozigotos, da raça Nova Zelândia Branco, distribuídos aleatoriamente em 3 grupos de 6 animais, para tratamento com o fármaco na dose de 3,5mg kg-1 a cada 24 horas, por 7, 15 e 30 dias. Nove animais foram utilizados para controle, tratados com solução fisiológica a 0.9%. Foram avaliadas a pressão intraocular (PIO), a pressão arterial média (PAM) e a pressão de perfusão ocular (PPO), ultrassonografia em modo-B e a angiografia fluoresceínica, antes e ao término dos tratamentos. Evidenciou-se discreta diminuição nos resultados da PIO, da PAM e da PPO após tratamento com sildenafil, entretanto não houve significância estatística. Observou-se aumento significativo do diâmetro da artéria oftálmica após 7 e 30 dias de tratamento e diminuição da pressão arterial média após 7, 15 e 30 dias de tratamento, sem diferença estatística. À angiografia fluoresceínica, observou-se que as fases arterial, artério-venosa e venosa iniciaram-se mais rapidamente nos animais após o tratamento, com diferença significativa na fase artério-venosa ao 7o e 15o dias. Foi possível admitir que o citrato de sildenafil melhora a circulação de sangue na retina de coelhos, através do aumento da velocidade do fluxo de sangue e diminuição da pressão de perfusão.

The effects of sildenafil on retrobulbar and retinal circulation were studied in 18 adult male, albino, homozygous rabbits, of the New Zealand White breed, randomly divided into 3 groups of 6 animals, for drug treatment at a dose of 3.5mg kg-1 every 24 hours, for 7, 15 and 30 days. Nine animals used for control were treated with saline solution at 0.9%. It was evaluated intraocular pressure (IOP), mean arterial pressure (MAP), ocular perfusion pressure (PPO), B-mode ultrasonography and fluorescein angiography before and at the end of treatments. A slight decrease in results of IOP, MAP and PPO after treatment with sildenafil was evident, however, there was no statistical significance. It was observed significant increased diameter of the ophthalmic artery after 7 and 30 days of treatment and decreased mean arterial pressure after 7, 15 and 30 days of treatment, with no statistical difference. On fluorescein angiography, it was observed that the arterial, arteriovenous and venous stages initiated more rapidly in animals after treatment, with significant difference on the arteriovenous stage at the 7th and 15th days. It was possible to admit that the sildenafil citrate improves blood circulation in the retina of rabbits, by increasing the speed of blood flow and decreasing the perfusion pressure.

Após a remoção do volume ocular ou de seu conteúdo, o implante de esferas de diferentes tipos de materiais previne a concentração da cavidade orbital. O objetivo deste estudo foi avaliar a esfera de polimetilmetacrilato (PMMA), utilizado como implante intraocular em coelhos submetidos evisceração. Doze coelhos da raça Nova Zelândia foram submetidos evisceração unilateral do olho esquerdo, com posterior implantação da esfera de PMMA com 12 mm de diâmetro. A avaliação clínica foi realizada diariamente nos primeiros 15 dias após a cirurgia e em intervalos de 15 dias até o final do período de estudo (180 dias). Para análise histopatológica, três animais por período experimental foram submetidos enucleação aos 15, 45, 90 e 180 dias após a evisceração. Não foi observada deiscência da ferida, sinais de infecção ou extrusão do implante em nenhum dos animais durante todo o período do estudo. O exame histológico revelou a formação de tecido fibrovascular ao redor dos implantes. O PMMA comportou-se como material inerte e não- integrável.

Spheres of different types of material are used for the replacement of lost volume after removal of the eye bulb or its content to prevent contraction of the orbital cavity. The aim of this study was to evaluate the scope of polymethylmethacrylate (PMMA) used as intraocular implant in eviscerated rabbit eye. Twelve New Zealand rabbits underwent unilateral evisceration of the left eye, with subsequent implantation of PMMA sphere 12 mm in diameter. Clinical evaluation was performed daily during the first 15 days after surgery and every 15 days until the end of the study period (180 days). For the histopathological analysis, three animals per trial underwent enucleation at 15, 45, 90 and 180 days after evisceration. There was no wound dehiscence, signs of infection or implant extrusion in any animal throughout the study period. Histological examination revealed the formation of fibrovascular tissue around the implants. The PMMA behaved as inert and non-integrable.

O cavalo, dado o seu meio ambiente, está sujeito a afecções frequentes da córnea e da conjuntiva, tecidos oculares bastante expostos a bactérias e fungos, principalmente Aspergillus spp. e Fusarium spp. As ceratites ulcerativas bacterianas e fúngicas, bem como as ceratites fúngicas não ulcerativas, caracterizadas principalmente pelo abscesso estromal, são frequentes nessa espécie. Ocorrida a lesão inicial, perpetua-se um ciclo vicioso, com liberação de citocinas inflamatórias, que desencadeiam uma rápida e severa infiltração corneal por células polimorfonucleares. A córnea torna-se sujeita à destruição por enzimas proteolíticas liberadas pelos micro-organismos e por células inflamatórias, capazes de desencadear a dissolução estromal e a perfuração do bulbo ocular. O tratamento clínico para a resolução da doença corneal e o controle da uveíte reflexa deve ser agressivo e associado, muitas das vezes, à terapia cirúrgica. Este artigo discorre sobre a fisiopatologia e o tratamento da ceratomicose em equinos.

Environmental and behavioral factors make horses susceptible to corneal and conjunctival lesions, since these structures are constantly exposed to bacteria and fungi specially Aspergillus spp. and Fusarium spp. Bacterial and fungal ulcerative keratitis, as well as non-ulcerative fungal keratitis such as stromal abscess, are frequent in horses. A "cascade" effect follows the initial lesion which triggers the release of inflammatory cytokines followed by an acute and severe infiltrate of polymorphonuclear cells in the cornea. The cornea becomes susceptible to the activity of proteolytic enzymes released by microorganisms and polymorphonuclear cells, resulting in stromal degradation and ocular perforation. The medical treatment targeting the corneal disease and the controlling of reflexive uveitis should be aggressive and surgical therapy should be associated in most of the cases. This paper reviews the pathophysiology of keratomycosis in horses and specific aspects of the treatment in this species.